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免疫組化主要用在病理標本上，病理標本制作非常復雜。首先用福爾馬林即甲醛進行固定。固定過程會導致福爾馬林蛋白和病理標本上原有的抗原進行交聯，交聯過程會導致抗原發生封閉。另外，后期病理標本的制作過程中，會用到非常多的試劑，比如酒精、二甲苯等。試劑也會造成病理組織本身抗原發生封閉。還有加熱過程，也會導致抗原發生封閉。抗原封閉會造成的后果，是使抗原不能非常好的暴露出來，即不能顯露出來，最終會導致免疫組化的結果不能夠正常表現出陽性，即原來應該陽性的部分由于抗原封閉之后不能造成明顯陽性表達，所以會影響免疫組化結果的判斷。 全世界都通用叫做抗原封閉修復的方法來解決這個問題。目前最主要的方法主要是兩種，一種是化學試劑方法，即用EDTA或者EGTA的方法，都可以使抗原很好被顯露出來，從而讓免疫組化陽性結果很好的表達出來。另外一種可以用高壓加熱修復，能使免疫組化的抗原很好的顯露出來，從而達到理想的免疫組化結果。