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第三代頭孢菌素具有廣譜的抗菌作用，可以用于多個部位的感染性疾病的治療。常用的第三代頭孢主要包括頭孢曲松、頭孢哌酮、頭孢他啶、頭孢地尼、頭孢噻肟等多個品種。第三代頭孢菌素相對于第一代和第二代的頭孢，它對革蘭氏陰性菌的抗菌活性更強，對大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌，產氣腸桿菌以及其它的革蘭氏陰性菌都具有比較明顯的抗菌作用。另外有些頭孢對銅綠假單胞菌具有比較高的敏感性，比如頭孢哌酮、頭孢他啶，并且第三代頭孢菌素對于β-內酰胺酶也比較穩定，因此在這個方面也會擴大它的抗菌譜。第三代頭孢菌素在使用的時候需要注意，有些藥品可能會影響患者的凝血功能，還有些頭孢菌素可能會與酒精有相互作用，因此在使用頭孢菌素期間不建議患者飲酒。