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多黏菌素在臨床上多用于抗革蘭氏陰性桿菌，主要是綠膿桿菌引起的感染，包括泌尿系統的感染、腦膜炎、肺部感染、敗血癥以及皮膚、軟組織、眼睛、耳朵、關節的感染等。 多黏菌素對其它革蘭氏陰性桿菌，如產氣桿菌、大腸桿菌、腸炎桿菌、流感桿菌引起的感染，也有非常好的治療效果，而細菌對多黏菌素和多黏菌素E之間有完全交叉的耐藥性。多黏菌素E適用于由敏感細菌所致的敗血癥、尿路感染、肺部感染，以及皮膚炎、鼻旁竇、耳等的局部感染。 對于綠膿桿菌感染，多黏菌素E可以作為首選藥物。