一般講，診斷軟下疳要特別謹慎，因為目前本病并不常見，但是如符合如下條件者可以作出診斷。

　　(1)發病前有不潔性交史。

　　(2)男女生殖器及尿道口出現一個或更多的潰瘍，基底軟，有疼痛與觸痛。

　　(3)單側腹股溝橫痃，疼痛，潰瘍排膿。

　　(4)暗視野檢查梅毒螺旋體陰性。

　　(5)涂片作姬姆薩染色查不到多諾萬小體(由日本人宮川發現的一種導致性病淋巴肉芽腫的致病菌)。

　　(6)梅毒血清試驗陰性。

　　(7)革蘭氏染色，可查到陰性鏈球菌，但可產生假陽性，有條件者可作細養。