根據發病前的性接觸史，尤其是不潔性交史，典型的臨床表現和經過，較短的潛伏期后發生軟而扁的丘疹、膿皰、潰瘍，單側性的化膿性淋巴結炎，直接鏡檢和培養檢出杜克雷嗜血桿菌，PCR檢測杜克雷嗜血桿菌DNA，即可作出診斷。
　　
　　診斷依據：Barber氏對本病診斷作如下建議，并作為診斷標準：①陰部潰瘍，一個或多個；②暗視野顯微鏡檢查，梅毒螺旋體陰性；③梅毒血清試驗陰性；④病損潛行性邊緣取材涂片，用瑞氏染色未發現朵諾凡小體（肉芽腫莢膜桿菌），而用革蘭氏染色可找到短小的革蘭氏陰性桿菌。