診斷梅毒必須結合病史、體檢和化驗結果綜合考慮，必要時，還需進行跟蹤觀察，家屬調查或采用試驗治療等輔助方法。
 
　　1、病史 要詢問患者有無婚外性接觸或不潔性交史性亂距就診有多長時間，性伴有無性病等；病人在生殖器等部位是否有過無痛癢的皮膚黏膜皮疹或破潰，有無二期或三期梅毒的表現，有無其他性病的表現；病人無婚外性接觸史時，應詢問結婚的次數與時間，配偶有無梅毒或其他性病；懷疑為胎傳梅毒時，應詢問其父母的性病史，其母的分娩史、患兒有無早期或晚期胎傳梅毒的癥狀與體征；懷疑為潛伏梅毒時，應詢問有無引起生物學梅毒血清假陽性的疾病；如以前曾有過類似梅毒狀的疾患，應詢問用過什么藥治療，是否規律足量，有無藥物過敏史等。
 
　　2、體格檢查 與一般內科，皮膚科疾病的檢查相同。對感染期比較短的病人，重點檢查全身皮膚黏膜，特別是生殖器、肛門、口腔等部位，女性病人要檢查子宮頸。對感染期較長的病人，除皮膚和黏膜以外，還要檢查心血管系統及神經系統有無異常。
 
　　3、實驗室檢驗

　　（1）組織及體液中梅毒螺旋體檢驗 從早期皮膚黏膜的皮疹和破潰處取材作涂片，用暗視野顯微鏡觀察可見梅毒螺旋體。

　　（2）梅毒血清試驗 一般對疑似梅毒患者均需作血清試驗，可先做非螺旋體抗原試驗，必要時再做梅毒螺旋體抗原試驗。常用的非梅毒螺旋體抗原血清試驗有血清不加熱的反應素玻片試驗（USR）、性病研究實驗室玻片試驗（VDRL）和快速血漿反應素環狀卡片試驗（RPR）。常用的梅毒螺旋體抗原血清試驗有熒光螺旋體抗血清試驗（FTA—ABS）和梅毒螺旋體血凝試驗（TPHA）。

　　（3）腦脊液檢查 包括腦脊液細胞計數、蛋白測定、梅毒血清試驗（常用VDRL試驗）和膠體金試驗，一般用于晚期病人且懷疑有神經梅毒者。
   
　　此外，對于皮膚黏膜損害也可應用活體組織病理切片檢查，從病理上進行診斷。
　　
　　在上述診斷梅毒的依據中，提及了梅毒血清試驗。人檢疫經常要問：梅毒血清試驗陽性是否肯定為梅毒患者呢？下面就講一下這個問題。 梅毒血清試驗結果必須結合病史和臨床癥狀進行分析，可以說梅毒血清試驗陽性者有很大可能患有梅毒，但并不一定都是梅毒，因為血清試驗可以出現假陽性，出現假陽性時可從兩個方面來考慮。

　　1、技術性假陽性 如果抽血后由于標本保存不妥當，產生溶血或被細菌污染，或者是編號錯誤及實驗室操作技術誤差，均可造成假陽性。根據有關統計，這種假陽性可占25%。出現這種情況，只要重復試驗，即可排除。

　　2、生物學假陽性 是由于患者有其他疾病或生理情況發生變化而引起。其他疾病主要是感染性疾病或免疫功能紊亂等，甚至正常人在發生組織的一般損傷時也可出現微弱陽性。
如梅毒血清試驗顯示陽性，但患者沒有病史和梅毒有關癥狀，則要認真分析檢驗的全過程有否出現過錯誤、患者有否出現生物學假陽性的疾病，還要考慮患者的生理狀況，從而作出正確的判斷。
　　
　　梅毒病人是唯一的傳染源。性接觸傳染占95%。主要通過性交由破損處傳染，梅毒螺旋體大量存在于皮膚粘膜損害表面，也見于唾液、乳汁、精液、尿液中。未經治療的病人在感染一年內最具傳染性，隨病期延長，傳染性越來越小，病期超過4年者，通過性接觸無傳染性。亦可通過干燥的皮膚和完整的粘膜而侵入。少數可通過接吻、哺乳等密切接觸而傳染，但必須在接觸部位附有梅毒螺旋體。由于梅毒螺旋體為厭氧性，體外不易生存，且對干燥極為敏感，故通過各種器物的間接傳染，可能性極少。輸血時如供血者為梅毒患者可傳染于受血者。先天梅毒是患有梅毒的孕婦通過胎盤血行而傳染給胎兒。一般在妊娠前四個月，由于滋養體的保護作用，梅毒螺旋體不能通過，故妊娠前四個月胎兒不被感染，以后滋養體萎縮，梅毒螺旋體即可通過胎盤進入胎兒體內傳染胎兒。